ПЦР-диагностика "клещевых" инфекций

Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).

Синонимы русские

ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза

Полимеразная цепная реакция на клещевые инфекции

Синонимы английские

Tick-bornediseases, polymerasechainreaction, PCR

Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:

Болезнь Лайма (клещевой боррелиоз). Возбудителем заболевания является спирохетаBorrelia burgdorferi.
Анаплазмоз человека, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз человека. Возбудителем заболевания является α-протеобактерияAnaplasma phagocytophilum.

В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещиIxodesscapularis,I.ricinus,I.pacificus и I.persulcatus.В России наибольшее значение имеют видыI.ricinus иI. persulcatus.

Моноцитарный эрлихиоз человека. Возбудителем заболевания является α-протеобактерияEhrlichiachaffeensis.Переносчик инфекции – иксодовые клещиAmblyomma americanum.

Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:

Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже – тремя) патогенами (ко-инфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.

Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.

Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций.

Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. В то время как для получения результата бакпосева и серологических тестов может потребоваться до нескольких недель (!), результат ПЦР может быть получен уже через несколько часов. Благодаря такой скорости, метод ПЦР считается самым лучшим способом диагностики острой инфекции.
Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов, напоминающие тутовую ягоду) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3% случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75% случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношенииE.chaffeensisи 90%в отношенииA.phagocytophilum,что позволяет считать ПЦР не только быстрым, но и самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
Высокая специфичность (60-85%). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.

Следует отметить ограничения метода ПЦР:

Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения;
Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при заборе образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.

В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.

Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.

Для чего используется исследование?

Диагностика боррелиоза,моноцитарного эрлихиоза человекаи анаплазмоза человека.

Когда назначается исследование?

При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
При обнаружении у пациента с лихорадкой «лабораторных» признаков клещевых инфекций: панцитопениии, повышения уровня печеночных трансаминаз.

Что означают результаты?

Положительный результат:

Боррелиоз (Borrelia burgdorferi),моноцитарный эрлихиоз человека(Ehrlichia chaffeensis)и/или анаплазмоз человека(Anaplasma phagocytophilum).

Отрицательный результат:

Норма;
Неправильный забор крови на исследование.

Что может влиять на результат?

Применение антибиотиков (тетрациклинов) до забора крови на исследование.

Важные замечания

Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания;
Применение антибиотиков до забора крови на исследование может приводить к ложноотрицательному результату.

Также рекомендуется

[02-029]Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ

[06-010]Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

[06-003]Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

[07-092]Вирус клещевого энцефалита, IgM

[07-095]Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)

[40-177]Полное серологическое обследование на "клещевые" инфекции

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Литература

Ismail N , Bloch KC , McBride JW . Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
Swanson SJ , Neitzel D , Reed KD , Belongia EA . Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.

Повернутись до списку