Leptospira, ДНК [ПЦР]

Выявление возбудителя лептоспироза (Leptospira) – инфекционного заболевания, которому подвержены многие животные (в том числе собаки, кошки, домашний скот, крысы) и которое может передаваться человеку. Распространяясь с мочой и калом, микроскопического размера лептоспиры поражают органы и ткани, отравляя организм продуктами своей жизнедеятельности.

Синонимы русские

Лептоспира, ДНК [ПЦР].

Синонимы английские

Leptospira, PCR (DNA).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, венозную кровь, ликвор, первую порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Начиная со второй недели заболевания лептоспиры накапливаются преимущественно в извитых почечных канальцах и исчезают из крови и других тканей. Такая избирательная концентрация в эпителии и межклеточном пространстве почечной ткани приводит к тяжелым повреждениям канальцев почек и нарушению мочеобразования, а в тяжелых случаях вызывает анурию (отсутствие мочеиспускания) и уремию (накопление в крови токсических продуктов азотистого обмена, нарушение концентрации электролитов крови и др.).

При персистенции лептоспир в почках признаков острой инфекции, как правило, нет, заболевание часто протекает в латентной форме.

Решающими для подтверждения диагноза «лептоспироз» в любой фазе заболевания, в том числе и на более поздних сроках инфекционного процесса, являются результаты лабораторных исследований: бактериологического (посева), серологического (определения титров специфических антител в сыворотке крови), молекулярно-генетического (определения ДНК лептоспир методом ПЦР).

Недостатком бактериологического метода является длительность проведения исследования из-за медленного роста лептоспир на питательных средах.

Серологическое исследование теряет свою значимость после 19-20-го дня болезни в связи с постепенным снижением титра сывороточных антител вследствие прекращения циркуляции лептоспир в крови. Кроме того, при тяжелом течении лептоспироза, особенно на фоне интенсивной терапии антибактериальными препаратами, антитела могут выявляться лишь спустя 2-3 месяца от начала болезни.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это молекулярно-генетический метод исследования, в ходе которого выявляется генетический материал (ДНК) лептоспиры в образце биоматериала. Методу свойственна высокая специфичность (100 %), чувствительность (от 10 до 1000 копий ДНК в пробе) и высокая диагностическая эффективность, даже на фоне проводимого лечения антибактериальными препаратами.

Одним из основных достоинств ПЦР является то, что она позволяет выявить возбудителя даже при условии присутствия последнего в организме в очень малых количествах.

Вместе с тем отрицательный результат ПЦР не должен быть основанием для прекращения диагностики, так как определить точно конкретную фазу заболевания не всегда возможно. Чувствительность лабораторной диагностики при лептоспирозах может быть значительно повышена за счет параллельного использования серологических тестов (определения титров антител в сыворотке крови) и метода ПЦР вне зависимости от фазы заболевания.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики лептоспироза.
• Для дифференциальной диагностики лептоспироза с другими заболеваниями.

Когда назначается исследование?

• При диагностике лептоспироза.
• При подозрении на персистенцию лептоспир в почках.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

• лептоспирозная инфекция.

Причины отрицательного результата:

• период полного выздоровления, когда формируется стойкий иммунитет и лептоспиры в организме уже отсутствуют.

Что может влиять на результат?

• Применение некоторых противовирусных препаратов – ингибиторов полимераз – иногда приводит к ложноотрицательному результату.

Также рекомендуется

• Общий анализ мочи с микроскопией осадка

Кто назначает исследование?

Инфекционист, нефролог, уролог, терапевт, врач общей практики, хирург, реаниматолог.

Литература

• Recommendations for the detection of Leptospirain urine by PCR «Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical» 37(2):131-134, mar-abr, 2004.
• Ganoza, C.A., Matthias, M.A., Saito, M., Cespedes, M., Gotuzzo, E., & Vinetz, J.M. (2010). Asymptomatic renal colonization of humans in the Peruvian Amazon by Leptospira. PLoS Neglected Tropical Diseases, 4 (2) DOI.
• World Health Organization (2003) Human Leptospirosis: Guidance for diagnosis, surveillance and control.
• Эпидемиология, диагностика и профилактика заболеваний людей лептоспирозами. Методические указания МУ 3.1.1128-02.
• Медицинская микробиология / под ред. В. И. Покровского, О. К. Поздеева. – М.: ГЭОТАР Медицина, 1999 и др. годы издания.